產(chǎn)品描述

李記生物的10×裂解液（10×Lysis Buffer）是一種比較強(qiáng)烈的細(xì)胞/病毒裂解液，主要成分為Tris-HCl、SDS以及Tween-20、EDTA等。裂解液裂解得到的核酸樣品可以用于常規(guī)的PCR、qPCR、ddPCR等。

本產(chǎn)品可以用于細(xì)胞/病毒樣品。

訂購信息

產(chǎn)品組分

運(yùn)輸與保存

藍(lán)冰運(yùn)輸。組分A在-20℃保存，組分B在4℃或室溫保存，有效期12個月。

使用方法

1.  從冰箱中取出10×裂解液，置于室溫條件下溶解，渦旋混勻后待用。

2.  10×裂解混合液配制：裂解試劑的單位使用量見下表，可按實(shí)際用量的1.1倍配制混合液，根據(jù)實(shí)際樣本量（N），取相應(yīng)體積的10×裂解液和Proteinase K（Proteinase K在使用前加入），渦旋振蕩混勻后使用。Proteinase K用量可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整。

3.  操作步驟

3.1  病毒樣本

取病毒溶液18μl和10×裂解液（含Proteinase K）混合液2μl，建議裂解條件如下，實(shí)際裂解條件可根據(jù)裂解體積作相應(yīng)調(diào)整。

3.2  細(xì)胞樣本

3.2.1   1×裂解液（含Proteinase K）配制

實(shí)驗(yàn)前根據(jù)實(shí)際需要，使用PDB（和元生物貨號：RP004）或PBS，將步驟2配制好的10×裂解混合液，稀釋至1×裂解混合液。

3.2.2   樣本前處理

①貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍，消化后離心收集細(xì)胞。

②懸浮細(xì)胞：400g離心5min收集細(xì)胞，輕輕渦旋振蕩或者彈擊管底以把細(xì)胞盡量分散開。

3.2.3   樣本裂解

按照＜1E7細(xì)胞量每孔加入100 μl的1×裂解液，渦旋振蕩15s充分裂解細(xì)胞，充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成＜1E7細(xì)胞/管，然后再進(jìn)行裂解。建議裂解條件如下，實(shí)際裂解條件可根據(jù)裂解體積作適當(dāng)調(diào)整。

4.  樣品充分裂解后稀釋10倍，可直接用于下游的PCR擴(kuò)增。

注意事項(xiàng)

1.  本產(chǎn)品于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2.  為取得的使用效果，盡量避免反復(fù)凍融，建議分裝后使用。

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